考马斯亮蓝法测蛋白质含量流程图
高蛋白大豆怎么辨别？
高蛋白大豆怎么辨别？
答案：1、可以用等电点法、盐析法、有机溶剂的分级沉淀法来提取。 2、用考马斯亮蓝结合法测定..
可以把黄豆磨成粉,和水,在纱布上揉,然后洗纱布,发现很难洗干净,证明蛋白质含量高,因为蛋白质最容易沾在纱布上。
考马斯测定蛋白质含量时稀释倍数怎么定？
用考马斯亮蓝法时，稀释蛋白的倍数主要取决于标准曲线的情况。 比如用BSA作标准曲线，第一个点加入0.02mg/ml的BSA，其后依次增加为0.04、0.06、0.08、0.1mg/ml。那么需要测定的蛋白质就需要稀释到浓度在0.02~0.1mg/ml之间。
什么是考马斯亮蓝法（Bradford法）？
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。
蛋白质有哪些显色反应？
蛋白质有四种呈色反应，分别是：
1、茚三酮反应：蛋白质与苯丙环三酮戊烃发生反应时，产生蓝色反应。
2、双缩脲反应：蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜反应呈现紫红色，并且所有的蛋白质都能发生双缩脲反应。
3、黄色反应：含有苯环结构的蛋白质与浓硝酸反应，蛋白质会被硝化成黄色物质。
4、考马斯亮蓝反应：考马斯亮蓝G250与蛋白质通过疏水反应后会变为蓝色。
考马斯吸光度适用范围
考马斯亮蓝显色法的基本原理是根据蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后，其对可见光的最大吸收峰从 465nm 变为 595nm。
在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下，当溶液中的蛋白质浓度不同时，就会有不同量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为 465nm 的形式转变成吸收峰为 595nm 的形式，而且这种转变有一定的数量关系。
一般情况，当溶液中的蛋白质浓度增加时，显色液在 595nm 处的吸光度基本能保持线性增加，因此可以用考马斯亮蓝 G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的含量。