黏性末端两种写法 遗传工程的基本步骤?

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黏性末端两种写法

遗传工程的基本步骤?

遗传工程的基本步骤?

1、提取目的基因
获取目的基因是实施基因工程的第一步。如植物的抗病(抗病毒 抗细菌)基因,
种子的贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因干扰素基因等,都是目的基因。用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段,一般使用人工合成的方法。
2、目的基因与运载体结合
将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。
3、将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后,下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。
4、目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。

icm什么意思网络用语?

英文缩写:ICM
英文全称:internet call manager
中文解释:互联网呼叫管理器
1.基因工程:是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA 重组技术。
2.黏性末端:限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端。
3.平末端:限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的则是平末端。

平末端和黏性末端是怎么缝合的?

这个问题问得不清楚,猜想是问DNA分子的平末端与黏性末端是怎么进行连接的,一般有三种方法:
1.末端补平法。将黏性末端的DNA分子用平末端酶处理去除5突出末端或补平3突出末端,这样两种DNA分子都是平末端连接;
2.在平末端DNA分子末端添加与另一DNA黏性末端互补的黏性末端接头,让平末端DNA变成黏性末端,两种分子最终通过黏性末端连接
3.同源重组连接,现在有成熟试剂盒,通过设计引物使其两端与另一DNA分子有15bps同源末端,扩增该DNA。特定重组酶可以将两个DNA分子进行同源重组,实现连接。